Präparative Voraussetzungen zur klinischen Histologie des menschlichen Knochenmarks

Zusammenfassung

Zum Zweck besserer histologischer Beurteilung von menschlichen Knochenund Knochenmarks-Biopsien werden die Vorbedingungen einer Acrylateinbettung größerer, fetthaltiger Gewebsstückchen untersucht. Dabei erweist sich diese Art der Einbettung als besonders empfindlich gegenüber der fixierenden und entwässernden Vorbehandlung der einzubettenden Gewebe. Als Kompromiß zwischen den Ansprüchen weitgehender Gewebeschonung beim Fixieren, Entwässern und Einbetten und den Erfordernissen einer möglichst gleichmäßigen Acrylat-Polymerisation ergibt sich eine Fixierung in gepuffertem Methanol-Formol mit direkt anschließender Entwässerung in reinem Methanol, unmittelbar gefolgt von Durchtränkung mit dem vollständigen Einbettungsgemisch aus Methacrylsäure-methylester, Nonylphenolpolygly koläther-acetat und Benzoylperoxyd. Einige Besonderheiten und Fehlerquellen der Acrylat-Einbettungstechnik werden an Hand mikrophotographischer Vergleiche erläutert. Unzulängliche Acrylateinbettung verursacht vor allem Quellungsartefakte. Bei gleich sorgfältiger Technik sind die mikroskopischen Ergebnisse des beschriebenen Präparationsverfahrens denen der zum Vergleich herangezogenen Methoden überlegen. Außerdem erleichtern die güngstigen mechanischen Eigenschaften der angegebenen Acrylat-Mischung die Herstellung von Dünnschnitten und von Schnittserien auch aus unentkalktem Knochengewebe.

Summary

For the improved histological evaluation of human bone-and bone marrowbiopsies the prerequisites of acrylate embedding of larger, fat containing tissue fragments were examined. It was found that this method of embedding is especially sensitive with regard to the fixation and dehydration treatment of the tissue to be embedded. A compromise between the demands of utmost tissue care during fixation, dehydration and embedding and the requirements of a most uniform acrylate polymerisation, we used fixation in buffered methanolformol with immediate subsequent dehydration in pure methanol, immediately followed by saturation with the complete, embedding mixture of methacrylic acid-methylester, nonylphenolpolyglycolether acetate and benzoylperoxide. A few special characteristics and sources of mistakes of the acrylate embedding method are explained by microphotographic comparison. Insufficient acrylate embedding causes primarily artefacts due to swelling. With equally careful technique the microscopic results of the described method of preparation are superior to the methods used for comparison. Furthermore, the favourable mechanical properties of the described acrylate mixture make the production of thin sections and serial sections of non-decalcified bone tissue easier.