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Eine sensible Komplementbindungsreaktion (KBR) zum Nachweis des Au/SH-Antigens und ihr Vergleich mit dem Agargeltest und der Gegenstromelektrophorese

A sensitive Australia antigen complement fixation test (CFT) and its comparison with the ouchterlony- and counter current electrophoresis techniques

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Medical Microbiology and Immunology Aims and scope Submit manuscript

Summary

Some parameters of Au/SH antigen micro CFT were investigated: dependance of maximum titer on complement dosis, incubation time and temperature; kinetics of the complement fixing antigen-antibody-reaction at +4°C; characterisation of the antigen-antibody-reaction in the two-dimensional CFT on the basis of the 50% hemolysis (isofixation curves); comparison of antigens of different concentration by means of the isofixation technique. The highest specific antigen-titers were obtained, when the amount of complement did not exceed 2C′H50, and cold incubation conditions at +4°C were applied. Using an indicator system with low concentration of sensitized sheep cells (o.d. 0.2 at 546 nm) CFT proved to be 200–300fold more sensitive than counter current electrophoresis and agar gel precipitation tests.

There seems to be a correlation between the clinical course of the disease and the amount of cf Au/SH antigen in the patients' serum. Thus, quantitative determination of Au/SH antigen might also be of prognostical value. In case of an acute uncomplicated hepatitis a continuously decreasing titer can be observed, whereas patients suffering from chronic active hepatitis or any other serious basic disease show a continuously high titer.

Zusammenfassung

Einzelne Parameter der Au/SH-Komplementbindungsreaktion, wie Abhängigkeit des Endwertes von der Komplementmenge, von der Inkubationstemperatur, von der Inkubationsdauer, ferner die Spezifität der Au/SH-Kälte-Komplementbindungsreaktion wurden untersucht und die Isofixationskurven des Au/SH-Antigens wurden ermittelt. Geringe Komplementmengen (2C′H50), die Durchführung der Kälte-Komplementbindungsreaktion und die Inkubation von 18 Std ergeben die sensibelsten Reaktionen.

Es konnte gezeigt werden, daß es sich bei der Au/SH-Antigen-Komplementbindungsreaktion um eine für den Nachweis von Australia-Antigen/Antikörper-Reaktionen spezifische Methode handelt. Die Isofixationskurve zeigte die Identität der 3 untersuchten Antigene, ferner den möglicherweise vorhandenen Lipidanteil und schließlich das Auftreten eines Prozonenphänomens im Antigen-Überschußbereich.

Bei dem Vergleich der 3 Methoden erwies sich die Komplementbindungsreaktion als die sensibelste der Nachweismethoden. Sie war etwa 100–150mal sensibler als die Gegenstromelektrophorese und 200–300mal empfindlicher als der Ouchterlony-Diffusions-Test.

Die quantitative Bestimmung des Au/SH-Antigens mit der Komplementbindungsreaktion im Verlaufe einer Hepatitis-Erkrankung ermöglicht u. U. prognostische Aussagen. Bei der unkomplizierten akuten Hepatitis kommt es zum kontinuierlichen Abfall der Serum Au/SH-Antigenkonzentration in Korrelation zur Besserung des klinischen Bildes. Dagegen weisen gleichbleibend hohe Au/SH-Antigenwerte im Serum möglicherweise auf einen prognostisch ungünstigen Krankheitsverlauf hin.

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Literatur

  1. Almeida, Jose, O. de: Isofixation curves as a method of standardizing quantitative complement-fixation tests. J. Immunol.76, 259–263 (1956).

    PubMed  Google Scholar 

  2. Bayer, M. E., Blumberg, B. S., Werner, B.: Particles associated with Australia-Antigen in the sera of patients with Leukemia, Down's Syndrome and Hepatitis. Nature (Lond.)218, 1057–1059 (1968).

    Google Scholar 

  3. Blumberg, B. S., Alter, H. J., Visnich, S.: A “new” antigen in leukemia sera. J. Amer. med. Ass.191, 541–546 (1965).

    Google Scholar 

  4. —, Gerstley, B. J., Hungerford, D. A.: A serum antigen (Australia-Antigen) in Down's Syndrome, Leukemia, and Hepatitis. Ann. intern. Med.66, 924–931 (1967).

    PubMed  Google Scholar 

  5. —, Riddel, N. M.: Inherited antigenic differences of human serum beta lipoproteins: a second antiserum. J. clin. Invest.42, 867–875 (1963).

    PubMed  Google Scholar 

  6. Gocke, D. J., Howe, C.: Rapid detection of Australia-Antigen by Counterimmunoelectrophoresis. J. Immunol.1+4, 1031–1032 (1970).

    Google Scholar 

  7. Kaboth, U., Schober, A., Arndt, H. J., Vido, I., Selmair, H., Gallasch, E., Verma, P., Thomssen, R., Creutzfeld, W.: Australia (SH)-Antigen-Befunde bei Leberkranken und Blutspendern. Dtsch. med. Wschr.95, 2157–2165 (1970).

    PubMed  Google Scholar 

  8. Kapp, J.-F., Höher, P. G., Kuwert, E.: Unveröffentlichte Ergebnisse1970/71.

  9. Krugmann, S., Giles, J. P.: Viral hepatitis. New light on an old disease. J. Amer. med. Ass.212, 1019–1029 (1970).

    Google Scholar 

  10. Kuwert, E.: Der Vergleich viraler Antigene mit der quantitativen Komplementbindungsreaktion am Beispiel virulenter und attenuierter Polioviren. Ein Beitrag zur intratypischen Stammdifferenzierung in der Poliovirusgruppe. Habilitationsschrift 1966.

  11. —, Lennartz, H.: Untersuchungen mit der Komplementbindungsreaktion anläßlich einer Coxsackie B5-Epidemie. Klin. Wschr.41, 809–815 (1963).

    PubMed  Google Scholar 

  12. Maltaner, E., Maltaner, F.: A further note on the quantitative determination of the fixation of complement by immune serum and complement. J. Immunol.29, 151–155 (1935).

    Google Scholar 

  13. Mayer, M. M.: Complement and complement fixation.In: Kabat and Mayer: Experimental Immunochemistry, 2nd Ed. Springfield, Ill.: Ch. C. Thomas 1961.

    Google Scholar 

  14. Mester, Th., Kuwert, E.: Über die Bestimmung der 50% Hämolyse und deren Beziehung zur Anzahl der sensibilisierten Erythrocyten bei der Komplementauswertung. Zbl. Bakt., I. Abt. Orig.187, 102 (1963).

    Google Scholar 

  15. Penttinen, K., Myllylä, G.: The platelet aggregation reactionIn: Viral hepatitis and tests for the Australia (Hepatitis-Associated) Antigen and Antibody. Bull. Wld Hlth Org.42, 957–992 (1970).

    Google Scholar 

  16. Pesendorfer, E., Krassnitzky, O., Wewalka, F.: Immunelektrophoretischer Nachweis von „Hepatitis-Associated-Antigen“ (Au/SH-Antigen). Klin. Wschr.48, 48–59 (1970).

    Google Scholar 

  17. Prince, A. M.: An antigen detected in the blood during the incubation period of serum hepatitis. Proc. nat. Acad. Sci. (Wash.)60, 814–821 (1968).

    Google Scholar 

  18. —: The high-voltage immunelectroosmophoretic (IEOP) technique for detection of SH-Antigen: application to blood donor screening and to study of liver disease. Vox Sang. (Basel)19, 205–212 (1970).

    Google Scholar 

  19. Purcell, R. H., Holland, P. K., Walsh, J. H., Wong, D. C., Morrow, A. G., Chanock, R. M.: A complement-fixation test for measuring Australia-Antigen and Antibody. J. infect. Dis.120, 383–386 (1969).

    PubMed  Google Scholar 

  20. Rapport, M. M., Graf, L.: Immunochemical analysis based on complement fixation. Ann. N. Y. Acad. Sci.69, 608–632 (1957).

    PubMed  Google Scholar 

  21. Saravis, C. A., Trey, C., Grady, G. F.: Rapid screening test for detecting Hepatitis-Associated Antigen. Science169, 298–299 (1970).

    PubMed  Google Scholar 

  22. Schmidt, N. J., Lennette, E. H.: Complement fixation and immunodiffusion testa for assay of Hepatitis-Associated “Australia”-Antigen and Antibodies. J. Immunol.105, 604–613 (1970).

    PubMed  Google Scholar 

  23. Sever, J. L.: Application of a microtechnique to viral serological investigation. J. Immunol.88, 320–329 (1962).

    PubMed  Google Scholar 

  24. Shulman, N. R., Barker, L. F.: Virus-like antigen, antibody, and antigen-antibody complexes in hepatitis measured by complement fixation. Science165, 304–306 (1969).

    PubMed  Google Scholar 

  25. Vyas, G. N., Shulman, N. R.: Hemagglutination assay for antigen and antibody associated with viral hepatitis. Science170, 332–333 (1970).

    PubMed  Google Scholar 

  26. Walsh, J. H., Yalow, R., Berson, S. A.: Detection of Australia-Antigen and Antibody by means of radioimmunoassay techniques. J. infect. Dis.121, 550–554 (1970).

    PubMed  Google Scholar 

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Authors and Affiliations

  1. Abteilung für Med. Virologie und Immunologie des Instituts für Medizinische Mikrobiologie, Klinikum Essen der Ruhr-Universität, Deutschland

    J. -F. Kapp, P. G. Höher, E. Kuwert, O. Thraenhart, D. Paar, W. Hengstebeck & H. -J. Roggenbach

  2. Medizinische Klinik und Poliklinik, Klinikum Essen der Ruhr-Universität, Deutschland

    J. -F. Kapp, P. G. Höher, E. Kuwert, O. Thraenhart, D. Paar, W. Hengstebeck & H. -J. Roggenbach

Authors
  1. J. -F. Kapp
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  2. P. G. Höher
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  3. E. Kuwert
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  4. O. Thraenhart
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  5. D. Paar
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  6. W. Hengstebeck
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  7. H. -J. Roggenbach
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Kapp, J.F., Höher, P.G., Kuwert, E. et al. Eine sensible Komplementbindungsreaktion (KBR) zum Nachweis des Au/SH-Antigens und ihr Vergleich mit dem Agargeltest und der Gegenstromelektrophorese. Med Microbiol Immunol 157, 58–74 (1971). https://doi.org/10.1007/BF02121292

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