Precipitation of S, M, X and Y potato viruses by polyethyleneglycols with different molecular weights

Abstract

The minimum concentration of polyethyleneglycol (PEG) with molecular weights 4000, 6000, and 15000 necessary for precipitation of S, M, X and Y potato viruses was determined. An excessive amount of PEG causes the precipitation of other protein compounds from potato leaf cell sap. In order to obtain highly purified samples, it is necessary to use just the minimum sufficient amount of PEG. Using the minimum quantity of PEG is, also, advisable from an economical point of view. The minimum concentration of PEG of given molecular weight differs for different potato disease viruses. The concentration of PEG necessary for precipitation of a given potato virus depends on the molecular weight of PEG used—4000, 6000 and 15000. As the molecular weight increases, the concentration of PEG necessary for precipitation decreases.

Abstract

Stanovili jsme minimální procentické množství tří druhů polyethylenglykolu (PEG) o m. v. 4000, 6000, 15000, které jo zapotřebí ke srážení S, M, X a Y virů bramboru. Nadbytečné množství PEG vysráží další bílkovinné složky ze štáv z listů rostlin bramboru. Abychom dosáhli purifikáty nejvyšší čistoty je proto zapotřebí dodržet minimálně potřebné množství PEG. Dodržení minimálního množství PEG je také vhodné z ekonomického hlediska. Minimální koncentrace PEG jednoho molekul. druhu potřebná ke srážení je různá pro různé druhy virů způsobujících choroby brambor. Jeden a tentýž virus se sráží při různých koncentracích PEG o m. v. 4000, 6000, 15000, přičemž koncentrace PEG potřebná ke srážení klesá se stoupající molekulovou vahou PEG.

U S a M virů izolovaných z rostlin bramboru a X viru izolovaného z rostlin tabáku se ukázala jako nejvhodnější homogenizace listů po předchozím mražení s 0,007m fosfátovým pufrem o obsahu 0,007m EDTA, 0,01m natrium diethylbarbiturátu a 0,01m cysteinu nebo cysteinhydrochloridu a o pH 7,4 (CE pufr). Odstranění chloroplastových zbytků bylo provedeno Cellitem. Při izolaci Y-viru vyhovovala nejlépe homogenizace CE pufrem bez předchozího mražení a odstranění chloroplastových zbytků Cellitem.